摘要：彝药是中国医学伟大宝库的一个重要组成部分，当前非物质文化遗产渐渐被人们所遗忘，需加大对其研究力度，因此彝药的开发与利用逐渐得到诸多学者研究的重点。白芨是多年生草本球根植物，主要分布在中国、日本及缅甸北部等地区，主要的化学成分为联苯类、菲类及其衍生物，有着广泛的药用价值及园林价值，主要功效是收敛止血、消肿生肌，有着较广的应用范围。。本文通过对彝药白芨有效成分的提取及体外抗菌活性强弱的探究，为彝药白芨更好地开发利用提供理论依据。
关键词：彝药；白芨；体外抗菌活性
Abstract: Yi medicine is an important part of the great treasure house of Chinese medicine. At present, the intangible cultural heritage is gradually forgotten by people, and the research on it needs to be strengthened. Therefore, the development and utilization of Yi medicine have gradually become the focus of many scholars' research. Paeonia lactiflora is a perennial herb bulbous plant that is mainly distributed in China, Japan, and northern Myanmar. The main chemical constituents are biphenyls, phenanthrenes and their derivatives, which have a wide range of medicinal and garden values. The main effect is to astringent and stop bleeding It has a wide range of applications. .This article provides theoretical basis for the better development and utilization of Yi medicine Bai Zhi through the extraction of the effective components of Yi medicine Bai Zhi and its antibacterial activity in vitro.
Key words:Yi medicine;Paeonia lactiflora; antibacterial activity in vitro.
前言：白芨是一种用药历史久远的中草药，早在明代《本草纲目》中就有这样的记载：白芨别名连吉草，白给等，其根是白色的，连及而生，故取名白芨[1]。当前，我国学者对白芨的化学成分、药理作用及临床应用研究已有了较多研究[2-4]，但是涉及彝药白芨的体外抗菌活性探究的文章则少之又少。抗菌活性是指抗菌药能抑制或者杀死病原微生物的能力，而体外抗菌试验是在体外测定微生物对某种物质的敏感程度的实验，常常用于评价抑杀病原菌的活性，现已广泛地应用于科研、生产和临床[5]。本文在前人研究的基础上，通过采取体外活性探究的方法，探索彝药白芨的理化性质，为现实中更好地开发和利用白芨提供理论依据，具有较高的社会价值。
1 材料与方法
1.1 研究材料
材料：白芨，产地为湖北省襄樊市谷城县
设备：圆底烧瓶、分液漏斗、球形冷凝管、索式提取器、铁架台、石棉网、酒精灯、滤纸、容量瓶、MLS-3780型立式电热压力蒸汽灭菌锅、BP211D电子天平、SW-CJ-1F型超净工作台、DHP-9162型电热恒温培养箱、DNG-9247型电热恒温干燥箱。
1.2 研究方法
分别用BP211D电子天平分别称取白芨各50g、100g、150g，并称取三份，稀醇提取法、水提法和索氏提取法对三份白芨进行提取。
1.2.1 乙醇提取法
将三份白芨样品加95%的乙醇100mL，加热回流1个小时左右，后将滤液进行过滤，抽干后进行干燥，之后加水定容至50ml。
1.2.2 水提法
将三份白芨样品加蒸馏水100mL，在室温下浸泡过夜，之后在50-60℃下水浴加热，约1个小时，之后将提取液进行减压浓缩，抽干后进行干燥，之后加水定容至50ml。
1.2.3 索氏提取法
采用萃取的方法，先将样品称好后移入滤纸筒内，然后准备好烧瓶、提取器、冷凝管等必备物品，之后连接好烧瓶提取器及冷凝管，接通冷凝水后加热，水沸腾之后，溶剂里的蒸汽从烧瓶进入到冷凝管中，而冷凝后的溶剂则会回流到滤纸筒内，而在提取内达到一定的高度时，就会携带所需要提取的物质一同从侧面的虹吸管流入到接收瓶中。溶剂就这样在仪器内循环流动，把所要提取的物质都带入到接收瓶内，直至回流装置内液体变为无色才可停止，然后将提取物过滤后在蒸发皿中浓缩，之后加水定容至50ml。
1.3 微生物培养
通过培养基进行制备，配方如下：胰化蛋白胨10g，酵母粉5g，氯化钠10g，pH7.4，水1000mL，琼脂2%-5%/L。将高压蒸汽灭菌锅温度设置为121℃，压强0.15Mpa，维持20min，然后对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、假丝酵母及链球菌进行纯种化培养。
1.4 体外活性探究方法
纯化培养3天的四种病原微生物分别加入到不同浓度和不同提取方法的白芨提取液各1mL依次进行对照实验，比较同等条件下不同的提取方法及不同的浓度下白芨提取物的抗菌活性情况。
2 研究结果
2.1 相同提取方法下不同质量白芨的体外抗菌活性比较
2.1.1 乙醇法提取白芨的体外抗菌活性比较
由表1可知，乙醇提取的白芨对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、假丝酵母、链球菌均有一定的抗菌能力。其中在相同情况下，随着白芨浓度的增大，体外抗菌活性也逐渐增大。
| 表1 乙醇法提取白芨的体外抗菌活性比较 | ||||
| 质量 | 大肠杆菌 | 金黄色葡萄球菌 | 假丝酵母菌 | 链球菌 |
| 白芨50g | +++ | ++++ | +++ | ++++ |
| 白芨100g | ++ | +++ | ++ | +++ |
| 白芨150g | + | ++ | + | ++ |
| 对照 | ++++ | ++++ | ++++ | +++++ |
2.1.2 蒸馏水法提取白芨的体外抗菌活性比较
由表2可知，蒸馏水提取的白芨对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、假丝酵母、链球菌均有一定的抗菌能力。其中在相同情况下，随着白芨浓度的增大，体外抗菌活性也逐渐增大。
| 表2 蒸馏水法提取白芨的体外抗菌活性比较 | ||||
| 质量 | 大肠杆菌 | 金黄色葡萄球菌 | 假丝酵母菌 | 链球菌 |
| 白芨50g | +++ | +++ | +++ | ++++ |
| 白芨100g | ++ | ++ | ++ | +++ |
| 白芨150g | + | + | + | ++ |
| 对照 | ++++ | ++++ | ++++ | +++++ |
2.1.3 索氏提取法提取白芨的体外抗菌活性比较
由表3可知，索氏提取法提取的白芨对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、假丝酵母、链球菌均有一定的抗菌能力。其中在相同情况下，随着白芨浓度的增大，体外抗菌活性也逐渐增大。
| 表3 索氏提取法提取白芨的体外抗菌活性比较 | ||||
| 质量 | 大肠杆菌 | 金黄色葡萄球菌 | 假丝酵母菌 | 链球菌 |
| 白芨50g | +++ | +++ | +++ | ++++ |
| 白芨100g | ++ | ++ | ++ | +++ |
| 白芨150g | + | + | + | ++ |
| 对照 | ++++ | ++++ | ++++ | +++++ |
2.2 不同提取方法下相同质量白芨的体外抗菌活性比较
2.2.1 三种提取方法下提取50g白芨的体外抗菌活性比较
由表4可知，乙醇提取的白芨对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、假丝酵母、链球菌均有一定的抗菌能力。其中在50g白芨的情况下，索氏提取法提取的白芨对金黄色葡萄球菌、假丝酵母菌及链球菌等3种细菌的体外抗菌能力最强，对大肠杆菌的抗菌能力则与水提取法持平。
| 表4 三种提取方法下提取50g白芨的体外抗菌活性比较 | ||||
| 方法 | 大肠杆菌 | 金黄色葡萄球菌 | 假丝酵母菌 | 链球菌 |
| 乙醇提取法 | ++++ | ++++ | ++++ | ++++ |
| 水提取法 | +++ | ++++ | +++ | +++ |
| 索氏提取法 | +++ | ++ | ++ | ++ |
| 对照 | +++++ | +++++ | +++++ | +++++ |
2.2.2 三种提取方法下提取100g白芨的体外抗菌活性比较
由表5可知，乙醇提取的白芨对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、假丝酵母、链球菌均有一定的抗菌能力。其中在白芨质量为100g的情况下，索氏提取法提取的白芨对金黄色葡萄球菌、假丝酵母菌及链球菌等3种细菌的体外抗菌能力最强，对大肠杆菌的抗菌能力则与水提取法持平。
| 表5 三种提取方法下提取100g白芨的体外抗菌活性比较 | ||||
| 方法 | 大肠杆菌 | 金黄色葡萄球菌 | 假丝酵母菌 | 链球菌 |
| 乙醇提取法 | +++ | ++++ | ++++ | ++++ |
| 水提取法 | ++ | +++ | +++ | +++ |
| 索氏提取法 | ++ | ++ | ++ | ++ |
| 对照 | ++++ | +++++ | +++++ | +++++ |
2.2.3 三种提取方法下提取150g白芨的体外抗菌活性比较
由表6可知，乙醇提取的白芨对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、假丝酵母、链球菌均有一定的抗菌能力。其中在白芨质量为150g的情况下，索氏提取法提取的白芨对四种细菌的抗菌能力均最强。
| 表6 三种提取方法下提取150g白芨的体外抗菌活性比较 | ||||
| 方法 | 大肠杆菌 | 金黄色葡萄球菌 | 假丝酵母菌 | 链球菌 |
| 乙醇提取法 | +++ | +++ | +++ | +++ |
| 水提取法 | ++ | ++ | ++ | ++ |
| 索氏提取法 | + | + | + | + |
| 对照 | ++++ | ++++ | ++++ | ++++ |
3 讨论
2010版《中华人民共和国药典》中明确规定，可使用的白芨药材为兰科植物白芨的干燥块茎[6]。我国民间有句歌谣：白芨味苦，攻专收敛，肿毒疮伤，外科最善，可见，白芨早在远古的中国就已拥有良好的功效。本研究通过梳理前人研究结果，同时采取三种方法对白芨提取物作体外抗菌活性分析实验，为更好地开发利用白芨，提高白芨的利用率有较高的现实价值。
本研究显示，相同提取方法下，白芨的质量越高，其体外抗菌活性最高，抗菌能力越强，该结果与国内外学者结果均一致[7-8]，分析其原因不难得出，白芨内含多种化学物质，其化学物质对细菌有一定的抵抗能力，而白芨的质量越高，内含的化学物质越多，对细菌的抵抗能力越强，体外抗菌活性就越高。同时，赵文娜等[9]学者采用相同方法对苦木提取物的体外抗菌活性研究实验也验证了这一结论。
调查发现，相同白芨质量下，不同的提取方法提取的白芨体外抗菌活性有所差异，且索氏提取法提取的白芨体外抗菌活性最高，抗菌能力最强，与胡欢[10]对卷柏的体外抗菌活性实验结果相一致，不难发现，索氏提取法对中草药及植物的提取相比乙醇提取法、水提取法选择性好，能耗低，设备简单，操作方便[10-11]，但也有部分学者表示，该方法耗时过长，无法适用于大样本的提取[12]，因此需要更多的学者不断挖掘发现更实用、更经济、更有效的药物提取方法。
4 结论
国内外虽然对白芨的化学成分与药理活性开展了很多研究[13]，但仍然只停留在中医中药的传统经验阶段，针对药用成分分析、药理实验等方面的工作依旧十分薄弱，特别是对其有效成分和药理活性的具体作用机制尚没有理清，也有学者对白芨及其替代品进行薄层分析[14]，但缺乏一定的权威性。下一步，笔者将查阅更多资料，咨询相关专家，不断探索彝药白芨的药理性质及提取方法，为彝药白芨更好地开发和利用提供现实依据。
参考文献：
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